原子力云母片的处理

问题描述

精选答案

运用原子力显微镜(AFM)表征3种DNA纯化试剂盒对DNA的纯化效果。方法：PCR扩增K562/A02细胞mdr1基因DNA，分别以3种不同的DNA纯化试剂盒对PCR产物进行纯化后，按终浓度为10 ng・μl-1固定在用1 ng・μl-1 L型多聚赖氨酸预先处理过的新剥离的云母片上，用AFM获取DNA扫描图像，分析评价3种DNA试剂盒对DNA的纯化效果。

实验原理

原子力显微镜（atomic force microscope，AFM）是具有原子级分辨率的新一代显微镜，因其能够对DNA、蛋白质、磷脂生物膜、多糖等生物大分子以及有机化合物的形态及功能进行观察研究而引起了人们的广泛关注。近十几年，运用AFM在固相载体表面研究DNA分子技术取得的巨大进步，大大地增进了人们在分子层面上对DNA分子的了解。AFM在样本制备上相对较容易，但用于DNA研究时，要想得到质量较高的DNA图像对DNA样品的纯度要求较高。我们选择了3种不同的DNA纯化试剂盒对K562/A02细胞株mdr1基因769bp DNA的PCR产物进行纯化后在相同条件下用AFM观测，通过比较，建议其中的两种可用于AFM的DNA样品的纯化。

主要试剂

1. 含10%小牛血清的RPMI 1640(Gibco/BRL公司产品)培养液

2. 酚/氯仿

3. 1ng・μl-1 L型多聚赖氨酸(Sigma公司产品)

4. 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒（DP2092，TIANWEI公司产品）

5. DNA小量胶回收试剂盒（W5211，2408A，Waston公司产品）

6. 琼脂糖凝胶DNA纯化试剂盒（DV805A，TaKaRa公司产品）

主要设备

1. 37℃、5%CO2培养箱

2. 低温冰箱

3. 紫外分光光度计

4. PCR仪

5. 紫外特摄仪

6. 电泳系统

7. Nanoscope AFM (Veeco/Digital Instruments，Santa Barbara，CA)

实验步骤

1. 细胞培养

K562/A02细胞株接种于含10%小牛血清的RPMI 1640(Gibco/BRL公司产品)培养液，置于37℃、5%CO2培养箱中常规培养，2~3d传代1次，实验前无药培养两周。

2. DNA提取

取对数生长期、终浓度2×105ml-1的K562/A02细胞3ml，以酚/氯仿法抽DNA后，加100μl TE缓冲液于-2

其他回答

天学英语

处理原子力云母片的方法包括以下几个步骤：首先，将原子力云母片进行清洗，去除表面的污垢和杂质。然后，进行热处理，将云母片加热至一定温度，以去除内部的水分和有机物。接下来，进行机械加工，将云母片切割、打磨或抛光，以获得所需的形状和光洁度。最后，进行表面处理，如涂覆保护层或进行化学处理，以增强云母片的性能和耐久性。处理后的原子力云母片可用于电子、光学、航空航天等领域。