pcr的底物主要包括哪四种
问题更新日期:2024-10-11 10:32:24
问题描述
pcr的底物主要包括哪四种求高手给解答
- 精选答案
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pcr技术的四种原料是dNTP、引物、模板DNA、Taq DNA聚合酶。
引物有多种设计方法,由PCR在实验中的目的决定,但基本原则相同。PCR所用的酶主要有两种来源:Taq和Pfu,分别来自两种不同的噬热菌。其中Taq扩增效率高但易发生错配。Pfu扩增效率弱但有纠错功能。所以实际使用时根据需要必须做不同的选择。
模板即扩增用的DNA,可以是任何来源,但有两个原则,第一纯度必须较高,第二浓度不能太高以免抑制。
缓冲液的成分最为复杂,除水外一般包括四个有效成分:缓冲体系,一般使用HEPES或MOPS缓冲体系;一价阳离子,一般采用钾离子,但在特殊情况下也可使用铵根离子。二价阳离子,即镁离子,根据反应体系确定,除特殊情况外不需调整;
辅助成分,常见的有DMSO、甘油等,主要用来保持酶的活性和帮助DNA解除缠绕结构
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