如何从浓缩的白细胞中高效的分离PBMC

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精选答案

我用一种叫buffycoat的东西分离PBMC，应该就是你说的取走血浆的血细胞了。看上去就非常的稠，静置一会就会分层，上层是淡黄色的，感觉像是血细胞，下层还是深红色。

我的方法是用这种液体稀释四倍后铺在ficoll上梯度离心，和全血一样。铺的时候没有全血好铺，感觉很容易和ficoll混起来，不像全血是‘飘’在ficoll上面的。分离后会看到一层特别特别厚的PBMC，厚到有的时候他们沾在一起一大团。

16ml的这种buffycoat我每次能提出100-300*10^6个PBMC来。

我用miltenye的柱子分离t细胞效果很好。