柱层析时平衡柱子有什么作用

问题描述

精选答案

装柱方法分为湿法和干法，一般来说，湿法装柱的效果优于干法装柱。

湿法装柱：先将柱层析的填料活化处理后浸润在适宜的有机溶剂中，使之处于有机环境。

装柱时在层析柱自下而上依次填入硅烷花玻璃棉→石英砂→已处理好的层析填料，一边装柱一边用洗耳球轻轻敲打，使填料紧实，然后打开旋塞放掉多余的有机溶剂即可进行样品分析。

干法装柱：现在层析柱内填入硅烷花玻璃棉，然后用不同极性的有机溶剂对层析柱的内壁进行充分润洗，待层析柱晾干，依次填入石英砂及各种层析填料，同样，一边装柱一边用洗耳球轻轻敲打，使填料紧实，然后加入一定量的有机溶剂淋洗填好的柱子，一般这个体积为柱子死体积的2倍。然后打开旋塞使淋洗液流出，即可进行样品分析。

填料紧实是保证层析柱柱效的关键，一定要注意。 层析柱最下层的棉花，我们一般是用硅烷花玻璃棉的，在马弗炉中活化即可用。

如果用脱脂棉，需要用二氯甲烷抽提3遍以去除杂质，以防干扰实验。