液相色谱仪的梯度洗脱有哪些优点

问题描述

精选答案

梯度洗脱装置分两种：高压梯度：用两台高压输液泵将两种溶剂输入低压梯度：在常压下将两种溶剂（或多元溶剂）混合，然后用高压输液泵将流动相输入到色谱柱中。

梯度洗脱可提高分离度、缩短分离时间、降低最小检测量和提高分离精度。

但在使用中，梯度洗脱也有许多与等度洗脱不同的地方需要注意。

梯度洗脱时应注意:

1、注意各溶剂间的互溶性。

2、对溶剂的纯度要求更高（影响重现性）。

3、注意梯度变化时系统压力的变化，防止超出限度。

4、梯度结束后，用初始流动相冲洗，使柱子平衡一段时间（再生），使系统回复到初始状态。

（梯度周期）5、低压梯度要注意脱气，混合后容易产生气泡。

6、容易出现鬼峰，应作空白试验。

7、梯度选择时尽量几相之间相变化要小,否则不易平衡。

8、梯度洗脱应使用对流动相组成变化不敏感的选择性检测器（如紫外吸收检测器或荧光检测器），而不能使用对流动相组成变化敏感的通用型检测器（如示差折光检测器）。

9、要注意水相中盐的浓度，防止在有机相提升过程中盐的析出。