什么是realtime PCR，什么是q-pcr，所用反应物质与普通PCR有何不同

问题描述

精选答案

实时定量PCR (real-time quantitative PCR),简称real-timePCR，q-pcr，q-RT-PCR等等，都是一个意思。普通PCR结果反映的其实是PCR的结果，而当PCR经过多伦循环到平台期后，很难反映原来模板的浓度；而实时定量PCR 反映的是PCR的过程，它起飞时间的Ct值可以精确反映模板的浓度。定义，操作，原理什么的我就不说了，自己查和文库，我就从实战给你点注意事项吧。

1 选好内参基因，特别是同一物种不同组织中某基因的表达情况，一定要别人报道过在你检测的组织中变化不大，如果你只是拿一个别的物种中的同源基因，别人肯定会argue你的，如果有可能可以双内参。

2 最好有标准曲线，标曲反应扩增效率，这样比较准确点，不然只能用2 delta delta t法了，有些杂志扣的话，不太好解释。标曲可以用cDNA来制备，还可以直接有已知模板来制（可以搜一下网上的标曲制备方法）

3 结果先看融解曲线，如果只有特异的单一融解峰，再去分析数据，不然没有意义。