histag纯化镍柱优缺点

问题描述

精选答案

His-tag 作为蛋白纯化时的首选标签，其优势在于：

（1） N-端的 His-Tag 与细菌的转录翻译机制兼容，有利于蛋白表达；

（2）采用 IMAC（固定化金属离子亲合层析）纯化 His-Tag 融合蛋白操作更加简便；

（3）His-Tag 对目的蛋白本身特性几乎没有影响，不会改变目的蛋白本身的可溶性和生物学功能；

（4）His-Tag非常小，一般不影响蛋白质的功能，且在融合蛋白结晶后对蛋白的结构没有影响；

（5）His-Tag 的免疫原性相对较低，可将纯化的蛋白直接注射入动物体内进行免疫并制备抗体；

（6）与其它亲和标签构建成双亲和标签，并可应用于多种表达系统，纯化的条件温和；His-Tag 融合蛋白的适用范围也较广，既可以在非离子型表面活性剂存在的条件下纯化，也可以在变性条件下进行纯化。前者通常用来纯化疏水性强的目的蛋白，而后者则通常纯化包涵体蛋白。