dna转化的方法有哪些
问题描述
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(1)直接转化法:有的微生物细胞在不加任何处理的情况下就能直接摄取外源DNA,只要外源DNA与这样的细胞混合,在适宜的条件下悬浮培养,就能完成外源DNA的转化。
(2)化合物诱导转化法:用二价阳离子处理某些受体细胞,可以使其成为感受态细胞,即处于能摄取外源DNA分子的生理状态的细胞。
(3)接合转化法:接合转化是通过供体细胞同受体细胞间的直接接触而传递外源DNA的方法。该转化系统一般需要三种不同类型的质粒,即接合质粒、辅助质粒和运载质粒(载体)。
(4)激光微束穿孔转化法:此方法是利用直径很小、能量很高的激光微束(laser:microbeam)聚焦成微米级的微束照射受体细胞,利用其热损伤效应可导致细胞膜的可逆性穿孔。
(5)超声波处理转化法:超声波法转化法就是利用低声强脉冲超声波的生物学效应击穿细胞膜造成通道,从而使外源DNA进入细胞。
(6)脂质体介导转化法:脂质体法是根据生物膜的结构和功能特征,用磷脂等脂类化学物质合成的双层膜囊将DNA或RNA包裹成球状,导入原生质体或细胞,以实现遗传转化的目的。
(7)电击法:电击法(eletroporation)也称电穿孔法,其原理是利用高压电脉冲作用在原生质体上“电激穿孔”,形成可逆的瞬间通道,从而促进外源目的基因的摄入。
(8)磷酸钙转染法:磷酸钙转染法的依据是有的动物细胞能捕获黏附在细胞表面的DNA—磷酸钙沉淀物,使DNA转入细胞。
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农杆菌转化法,基因枪法,钙离子介导法,花粉管通道法,显微注射法……
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