pcr引物加多了怎么办

问题描述

精选答案

1.最好的办法就是重新设计引物，一般来说引物之间存在大量的碱基互补配对就会容易形成引物二聚体。推荐使用Primer 5进行引物设计，软件里会清晰的显示引物二聚体形成的情况。

2. 如果不想重新设计引物，可以考虑提高退火温度试一试，较高的退火温度会大大降低引物二聚体的形成。

3.减少引物的使用量，建议把加入引物的量减少一半试试，一般PCR体系里引物是过量的，减少引物的量对PCR反应影响不大，但是能一定程度上降低引物二聚体，毕竟引物少了，两对引物间两两结合的概率也就低了。