蛋白染色剂怎么用
问题更新日期:2024-10-12 07:18:35
问题描述
蛋白染色剂怎么用求高手给解答
- 精选答案
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1.电泳完成后,在每个装有凝胶的盒中加入去离子水200 ml,微波1分钟,在水平摇床上震荡冲洗10分钟,以去除残留的SDS。重复此步骤两次。 (这一步至关重要,会较大影响染色的持续时间和敏感性)。
2.使用染色液前,将染色液混匀,每个盒中加入25ml染色液。(适用于8cm X 8cm X 1.5mm的SDS-PAGE凝胶,可根据实际尺寸增减)。
3.在水平摇床上摇15分钟到1小时。
4.10分钟内逐渐出现蛋白条带,1小时内达到90%染色效果。
5.脱色步骤一般是不必要的,但脱色会进一步降低背景。
6.加入200毫升自来水,在水平摇床上摇10分钟到半小时。
7.本品也可用于Tricine凝胶染色,用40%甲醇、10%醋酸固定30分钟至1小时,然后从第2步开始染色,延长脱色时间至2小时或过夜。
8.为了不污染环境,丢弃前,每毫升加入30mg NaOH。
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