乳酸的化学检测方法

问题描述

精选答案

组织：按照质量（g）：提取液一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于4℃，12000g离心10min后取上清待测。

b.细胞：按照细胞数量（106个）：提取液一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；于4℃，12000g离心10min后取上清待测。

c.血清（浆）：取100µL血清（浆）加入0.9mL提取液，4℃12000g离心10min后取上清待测。

二、测定操作

1、分光光度计/酶标仪预热30min，波长调至450nm，分光光度计用蒸馏水调零。

2、标准液的稀释：将100µmol/mL的标准溶液用蒸馏水稀释为10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125、0µmol/mL的标准溶液待测。

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乳酸和濃硫酸一起温和地温热，就会分解成乙醛和甲酸；甲酸立即分裂。

試管中，置于水浴内，在85°加热2分钟。放在自来水龙头下冷却至28°后，加入固体对－羟基联苯一撮，再将混合物搅拌数次，放置10至30分钟，将会逐渐出现紫色。过了一些时其色加深。鉴定限度：1．5微克乳酸

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四川成考助学

EDTA定钙法是目前测定发酵液中乳酸含量的主要方法.本文采用对照乳酸结合高效液相色谱法对该方法的测定条件进行了研究.结果表明,发酵液中的乳酸必须预先用过量的 CaCO3中和,再用 NaOH调节 pH至 12.0以上,以钙黄绿素为指示剂时,测定结果的重复性和回收率较好.HPLC法与 EDTA定钙法测定结果比较,发现 EDTA定钙法测定的乳酸含量偏大,但可通过适当校正用于生产过程检测.