原核表达重组蛋白的原理

问题描述

精选答案

将克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌(Escherichia coli)用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。大肠杆菌原核表达是实验室常用的重组蛋白合成方法，具有易生长控制，成本低廉，操作简单等特点。但是由于大肠杆菌表达的蛋白缺少糖基化和修饰，磷酸化和修饰以及翻译后加工，所产生的蛋白一般不具有生物活性，但是其免疫位点存在，所以对于我们以后免疫产生抗体以及试剂盒的调试不存在影响。

其基本步骤如下：

1、获取目的基因；

2、构建重组表达载体；

3、获取含重组表达质粒的表达菌种；

4、诱导表达；5蛋白纯化