gst亲和原理
问题更新日期:2024-10-12 17:07:23
问题描述
gst亲和原理急求答案,帮忙回答下
- 精选答案
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谷胱甘肽-S-转移酶(GST)是生物体内的一类重要的代谢酶,参与外源和内源有毒物质的代谢。
GST通过催化还原型的谷胱甘肽(GSH)和有毒物质偶联反应,使有毒化合物的水溶性增加从而更容易排出体外,最终达到解毒的作用。
利用这个原理,将GST做成标签表达出融合蛋白,与带谷胱甘肽配基的亲和介质特异性结合,从而纯化出目标蛋白,再用特异性的酶将GST标签切除从而得到天然蛋白。
- 其他回答
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GST亲和层析是利用GST融合蛋白与固定的谷胱甘肽(GSH)通过硫键共价结合,通过GSH交换洗脱的原理来进行纯化。
该纯化柱中,凝胶手臂上通过硫键结合一个GSH,然后利用其与GST-tag之间酶和底物的特异性作用力,使得带GST标签的融合蛋白能够与凝胶上的GSH结合。
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