pcr产物回收浓度低的原因
问题更新日期:2024-10-13 01:21:14
问题描述
pcr产物回收浓度低的原因求高手给解答
- 精选答案
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洗脱液提前在水浴锅中50-60℃预热,同时多次洗脱液可以提高回收率;
一些PCR产物中可能存在石蜡油,石蜡油会导致回收率降低,因此建议清除石蜡油;
使用新配的TAE Buffer作为电泳缓冲液,TBE Buffer或反复使用的TAE Buffer都将影响DNA的回收率;
在电泳时上样孔尽量加满,这样可以在后续切胶过程减少回收胶的重量;
切下带有目的条带的胶块体积越小越好;
切胶后利用胶回收试剂盒回收,凝胶溶解要充分,溶完胶后稍凉一下再上柱,高温条件下DNA不易与柱结合;
- 其他回答
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如果特异性很好,可以优化反应条件,比如增加模板浓度,降低退火温度,增加循环数等。 其实,如果只是为了回收产物,也可以多扩增几管,合并。
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