tmt质谱定量技术原理

问题描述

精选答案

Tandem Mass Tag™ (TMT™) 是 Thermo Scientific公司的专利产品，用于标记不同的蛋白样品并同时进行高通量的 LC-MS/MS 的定量研究 。目前有 2-、6-、10- 等 3种通量类型，可分别平行处理 2个、6个和 10个样品，显著提高了蛋白样品质谱检测的通量，减少所需质谱机时；同时，由于采用了稳定同位素标记不同样品，在标记实验之后所有样品混合成一个进行后续处理，大大降低了实验误差，使得定量准确性显著提高。

TMT 标记定量实验流程:

2-、6-、10-个样品分别提取总蛋白，取等量蛋白进行 Trypsin 酶切，得到相应样品的多肽；分别用不同的 TMT 标签对 2-、6-、10- 个样品进行标记，随后等量混合成一个样品并进行LC-MS/MS 分析和后续的数据库比对，鉴定出样品中含有哪些蛋白以及每个蛋白在样品中相对含量。