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用什么办法可以提取DNA

徐慢慢建筑 | 简单学习,快乐成才!         
问题更新日期:2024-10-13 06:50:02

问题描述

用什么办法可以提取DNA求高手给解答
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发光是因为用了发光物质标记的。 利用液氮对组织进行研磨,从而破碎细胞。细胞提取液中含有的SDS溶解膜蛋白而破坏细胞膜,使蛋白质变性而沉淀下来。EDTA抑制DNA酶的活性。再用酚、氯仿抽提的方法去除蛋白,得到的DNA溶液经乙醇沉淀。取4g新鲜叶片,在液氮中研磨成粉末状(越细越好)。 2.转移至50mL离心管中,加人16mL细胞提取液,充分混匀。

65 ℃水浴保温20min。 3.从水浴中取出离心管,加人5mL5mol/LKCl溶液,混匀,冰浴20 min。 4.4000r/min离心20min。 5.将上清液转移到另一50mL离心管中。 6.加等体积酚/氯仿混匀,12OO0r/min离心5min,取上清。 7.加等体积氯仿,混匀,12000r/min,离心5min,取上清。 8.加人0.6-1倍体积的异丙醇(沉淀DNA),混匀。 9.离心获得沉淀,70%乙醇洗3次。风干沉淀。 10.加人500μLTE缓冲液,溶解DNA。 11.取3μL上清液,琼脂糖凝胶电泳检测DNA浓度、质量。最后用EB跑电泳就可以看到你在电视上看到的发光的dna了