qpcr检测结果如何分析

问题描述

精选答案

qpcr检测结果分析三种用参照基因进行相对定量的方法：1) Livak 法，即众所周知的2–ΔΔCT法 2)用参照基因的 ΔCT 法 3 ) Pfaffl 法，每种方法都有优点和缺点，并且必须满足分析实验结果的前提条件。

进行相对基因表达分析普遍采用操作简便的2–ΔΔCT 法，条件是目标基因和参照基因扩增效率都接近 100% 且相互间效率偏差在5% 以内。使用2–ΔΔCT 法之前，必须验证目标基因和参照基因的扩增效率。一旦确定目标基因和参照基因有相似且接近 100% 的扩增效，你就可以确定不同样本中目标基因表达水平的相对差异