蛋白表达与纯化步骤

问题描述

精选答案

1

取适当相应蛋白高表达的动物组织提 total-RNA。

2

设计蛋白表达引物。 引物要去除信号肽， 要加上适当的酶切位点和保护碱基。

3

RT-PCR， KOD 酶扩增获取目的基因 c DNA.

4

双酶切， 将 cDNA.克隆入 PET28/32 等表达载体。

5

转化到 DH5α 感受态细菌中扩增， 提质粒。