gst融合蛋白为什么容易掉标签

问题描述

精选答案

标签蛋白可能改变 GST 的构象，因此降低了 GST 标签蛋白的结合能力。

解决办法：检测所使用的 pGEX 载体中 GST 的结合。准备带有所使用的 pGEX 的细胞超声裂解物，检测其与 Glutathione Sepharose 的结合，如果结合的很好，则可能是标签蛋白改变了 GST 的构象，因此降低了 GST 标签蛋白的亲和力。可以通过降低结合温度到 4oC 限制洗涤来改善结果。