溶解引物需要什么水

问题描述

精选答案

先离心！然后加入适量的水或TE溶解。一般配制成较高浓度的母液（约100μM），保存于-20℃。使用前取出其中一部分用ddH2O配制成10μM或20μM的工作液。引物浓度不宜偏高，浓度过高有两个弊端：

一是容易形成引物二聚体（primer-dimer），

二是当扩增微量靶序列并且起始材料又比较粗时，容易产生非特异性产物。

一般说来，用低浓度引物不仅经济，而且反应特异性也较好。一般终浓度用0.25-0.5pM/μl较好。

1 引物的分子量如何计算？

比如：AAGCTTTTACCGC的分子量是多少？

2 OD值，1个OD值是不是等于40UG。

3 质量数，质量数的含义是什么，怎么计算？

4摩尔数（μmol）和终浓度(pM)和稀释水量（μl）是不是计算稀释引物都要用到以上四点的各个参数？

具体的公式是什么呢？

合成引物的单子上应该有算法：1OD=33ug1个碱基的分子量=324.5（以上为近似值，通常都这样用）1条引物的分子量=碱基数*324.5质量数=OD*33ug摩尔数=质量数/分子量先离心的原因是什么？

因为引物合成后是干粉状的，在运输过程中可能会沾到管壁或管盖上，直接打开有些粉末可能会飘出去，引物的量就减少了。

先离心使粉末都到管底，可以避免这种现象的发生。

然后根据以下公式可计算出所加双蒸水的量33nmol/OD×管上所标OD值×100是为10pmol/ul浓度的引物溶液,还可以由此推算其它浓度所需的双蒸水量。可于－20度保存。订引物回来的说明书背面一般都有引物稀释计算的说明的.注意分装！