为什么形成配合物后荧光强度增强
问题描述
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溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中,大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料分子插入后,其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用。这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近,导致与DNA结合的染料呈现荧光,其荧光产率比游离溶液中染料有所增加。
DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料,而被结合的染料本身吸收302nm和366nm的光辐射。
这两种情况下,被吸收的能量在可见光谱红橙区的590nm处重新发射出来。
由于溴化乙锭-DNA复合物的荧光产率比没有结合DNA的染料高出20-30倍,所以当凝胶中含有游离的溴化乙锭(0.5ug/ml)时,可以检测到少至10ng的DNA条带。
- 其他回答
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形成配合物后荧光强度增强的原因主要包括两个方面。
首先,配合物中的金属离子可以提供额外的能级,使得激发态和基态之间的能量差更大,从而产生更长的波长和更高的能级的荧光发射。
其次,配合物中的配体可以增强金属离子的稳定性,减少非辐射能量的损失,使得更多的激发态能量可以通过荧光方式释放出来,从而增强了荧光强度。
因此,形成配合物后,金属离子和配体之间的相互作用促进了荧光效应的增强。
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