dapi粉配制

问题描述

精选答案

1、用1mLddH2O将DAPI溶解，制得2.9mM的DAPI溶液（1mgDAPI/1mL H2O）。

注：DAPI不能直接用PBS等缓冲溶液溶解，需要先用水将其溶解。

2、取适量DAPI水溶液加到PBS中，制备成10~50µM的DAPI溶液。 推荐以下PBS的配制方法： 将8.00g NaCl、0.20g KCl、2.9g Na2HPO4·12H2O、0.2g KH2PO4溶解于1L纯水中。

3、将1/10培养基体积的DAPI溶液加入到细胞培养基中。也可以1/10浓度的DAPI缓冲液代替培养基。

4、在37℃培养细胞10~20分钟。

5、用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。

6、用带有360nm激发波长，460nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。