pcr内参不齐原因
问题更新日期:2024-10-15 14:16:15
问题描述
pcr内参不齐原因求高手给解答
- 精选答案
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PCR内参不齐的原因可能有多种。首先,可能是由于样本质量不佳,如DNA浓度不均匀、受到污染或降解等。
其次,PCR反应条件可能不适合,如引物浓度不准确、反应温度不稳定等。
此外,PCR反应过程中可能存在技术操作不当,如反应液混匀不均、反应时间不准确等。
另外,PCR反应体系中可能存在抑制物质,如PCR抑制剂、残留的酶等。因此,为了解决PCR内参不齐的问题,需要优化样本处理、反应条件和技术操作,并排除可能存在的抑制物质。
- 其他回答
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不同基因之间表达量差异很大,可达上千甚至上万倍之差,所以CT值差10以内属正常现象,但通常选用内参基因属于表达量较高的持家基因,如果目标基因和内存基因表达量(CT值差)过大,用内参基因来衡量目标基因的表达量(绝对值)就不完全可靠,但至少可以说明目标基因表达非常低.
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