DNA室温解冻需要多久
问题描述
- 精选答案
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冻胚解冻所需要时间跟冻胚类型有关系,如果解冻胚胎属于卵裂期胚胎,也就是受精以后在体外培养到第三天,此类胚胎解冻时间也就是在解冻液中所需要经过时间,大约半个小时就可以完成,而且解冻以后胚胎需要在体外培养液中,再适应一段时间进入宫腔内。一般卵裂期胚胎,在体外复苏和适应大约一个小时就可以移植。
如果解冻的是囊胚,也就是在体外培养到第5-7天所形成胚胎,由于囊胚所应用解冻液和卵裂期胚胎不一样,解冻过程可能更简单一点。但在解冻以后,囊胚由于有囊腔,需要扩张,一般在体外培养两个小时,甚至更长一些时间,部分胚胎甚至需要提前在头一天下午进行解冻,让囊胚有很好复苏和囊腔扩张。因此,囊胚解冻所需要时间,跟胚胎类型密切相关。
- 其他回答
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10分钟。
原理
1.室温解冻血样,约10分钟。
解冻
2.取250ul血样,加1ml T10E10,上下翻动10分钟。
破碎红细胞
3.样品8000rpm,6分钟离心。
将白细胞和蛋白质沉淀
4.弃上清,沉淀用500ul T10E1冲洗后,8000rpm,6分钟离心。
离心将会分层蛋白质和白细胞,白细胞
沉淀在下层。
5.弃上清液,加300ul USSTE裂解悬浮,用力震荡。
破碎白细胞
6.用等体积的饱和酚抽提,混约2分钟,然后10000rpm,10分钟离心。
饱和酚将1.有效变性蛋白质2.抑制DNAse的降解作用
但是缺点有:能溶解10-15%的水,从而溶解一部分poly(A)RNA.2.不能完全抑制RNAse的活性
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