pcr为什么加甘油

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精选答案

甘油能降低高G+C区域的二级结构，能促进长距离PCR和提高标准PCR方法的反应专一性。此外，有报导在多重PCR(O.Henegariu等，Biotechniques，1997，23504)和等位专一PCR(R.S.Cha等，PCR Methods and Applications，1992，214)反应液中添加甘油。上述研究有二个共同特点，

第一，甘油浓度较低通常为5-10％(V/V，下文中未指明的均指体积百分比)，文献报导的最高浓度为20％(Y.H.Liu等，Trends in Gentics，1993和S.Vilcek，Journal Virological Methods，1993，41245)

第二，添加甘油后变性温度包括首次和循环变性均仍采用常规的94或95℃。尚未有文献或专利将甘油浓度扩展至20-45％，并且将含5-45％甘油的PCR反应的首次变性温度提高到大于95℃至98℃，循环变性温度降低到小于94℃至60℃的报道。

在一管法RT-PC方面，至今仅有一篇文献(T.W.Myers等，PCR Strategies，p.58-68，Ed.M.A.Innis等，1995)在反应液中添加3％甘油，加上原来由DNA聚合酶和反转录酶试剂带进的2％甘油，使PCR能在含5％甘油反应液中进行。未有将一管法RT-PCR反应液的甘油浓度扩展至5-25％的报道。