Folin-酚法测蛋白质的原理和操作

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精选答案

Folin-酚法蛋白定量包括两步反应:第一步生成蛋白质一铜络合物; 第二步是酚基将磷钥酸、磷钨酸试剂还原. 试剂甲由A(4%碳酸钠溶液与0.2mol/L氢氧化钠溶液等体积混合)和B(1%硫酸铜溶液与2%的酒石酸钾钠溶液等体积混合)两种溶液组成.你说的加了甲后10min再加乙,因为第一步反应肯定要时间的,试剂甲当然不能省了,其他的不说,它最起码提供了碱性的反应条件,Folin-酚法测定蛋白酶活力的原理是蛋白酶水解酪蛋白产生Tyr, 在碱性条件下，Tyr与Folin试剂反应生产蓝色物质，于680nm比色测定光吸收值，计算酶活力。

要绘制 Tyr标准曲线,这两个共同的步骤是第二步显色反应.