AnnexinⅤ-FITC/PI能否用于测定细胞周期

问题描述

精选答案

Annexin V-FITC/PI是用来测细胞凋亡的，测细胞周期可以用其中的PI，但用Annexin V-FITC/PI来测细胞周期比较浪费试剂。 测细胞周期的大致步骤如下：

1. 收集1 x106个细胞，1500rpm离心5 min，弃上清。同样离心条件下，用4℃预冷的PBS洗细胞两次。

2. 完全去除上清，加入-20℃预冷的70%乙醇1 ml，立即充分混匀，于4℃固定过夜或-20℃长期固定（可保存数周）。

3. 细胞染色1500rpm离心5 min，弃上清，以1 ml PBS洗涤细胞2次。用100 μl 1 mg/ml的RNase溶液重悬细胞，37℃水浴30 min。加入150 μl 50 μg/ml的PI染色液，混匀后室温避光染色30 min。

4. 流式分析以标准程序用流式细胞仪检测，一般计数3万个细胞，分析结果。