pcr退火温度为什么55度

问题描述

精选答案

实际pcr的退火温度一般都是从55℃开始的,有杂带退火温度就提高一点,目的带比较微弱退火温度就降低一点,不用管那个引物单子上的温度,那样太麻烦,有的实验室一天做几百个样品的pcr,如果个个要看引物单子上的温度然后在设计条件,你想想看,那得用多少台pcr仪器啊,所以一般都取默认条件,55℃30s

其他回答

财务要细心

1、PCR退火温度通常设定为55度，是因为在这个温度下，DNA链的两股可以相对稳定地分离，使得引物能够与目标DNA序列特异性地结合。

2、此外，55度也可有效降低DNA的气泡形成，减少扩增产物的非特异性产生。

3、因此，选择55度作为PCR退火温度可以提高扩增特异性和效率。

其他回答

工程机械

pcr选择50℃作为退火温度的参考温度是因为一般引物tm值大概位于48～55℃，但是这仅仅是参考值，退火温度一般为引物最低tm值减2，或平均tm值减4，而且要获得最好结果一般需要进行优化。