为什么pcr产物在孔里跑不下来

问题描述

精选答案

凝胶电泳的分离原理本质上是类似于分子筛的机制。DNA在碱性缓冲液中带负电，在凝胶中由点样孔向正极移动，分子量越大移动越慢，当分子量超过凝胶的孔洞孔径则不能移动。pcr产物电泳不能出点样孔就说明pcr产物极大，这种情况就是pcr失败，没有获得特异性扩增产物，而是非特异性的多聚体扩增产物。

产生这种产物的原因，主要是引物专一性不够好或者扩增区段上含有重复序列所致。