乳液pcr的检测方法

问题描述

精选答案

乳液PCR是在PCR反应前，将包含PCR反应所有成分的水相与油相按一定比例混合，在一定转速搅拌力的作用下形成无数个大小相对均匀稳定且在油相中悬浮的小水滴，由于油相的阻隔，这些小水滴构成了独立的PCR反应空间，使每个乳液颗粒中的PCR反应能够独立进行而互不干扰，同时能有效的把干扰物和模板隔开，相当于无限稀释。

其最大特点是可以形成数目庞大的独立反应空间以进行DNA扩增，最理想的状态下每个小水滴中只含有一个DNA模板，因此小水滴中的PCR反应不会受到竞争干扰。但当目的片段的模板量较少时只有少量的乳液颗粒中有模板，如只有万分之一的乳液颗粒中有模板时，那么最后的产物总量只有常规PCR的万分之一，不能通过常规电泳等手段进行检测。