dna染色液的配制

问题描述

精选答案

dna染色液的配制方法如下：

1 配制提取液之前，先配制母液。

母液（灭菌）：5M NaCl ( 58.4g加ddH 2 O制成200ml溶液)

0.5M Na 2 -EDTA(37.22g+ddH 2 O至200ml,用NaOH调pH值为8.0)

1M Tris-HCl(12.11gTris-HCl+ ddH 2 O至100ml,用浓盐酸调pH值至8.0)

2 提取液配方

100ml

加入：CTAB粉剂 2g

1M Tris(pH8.0) 10ml

0.5M EDTA(pH8.0) 4ml

5M NaCl 28ml

PVP 1g

β-巯基乙醇 1ml

加双蒸水定容至100ml

3 抽提液

分别量取苯酚、氯仿、异戊醇按25：24：1的体积比混合，再分别量取氯仿、异戊醇按24：1的体积比混合，配制成两种抽提液，各配制100ml

4 0.1xTE

1mlTris，20µl EDTA中加H 2 O, 用HCl调pH至8.0, 定溶，灭菌