pcr出现杂带为什么要升高退火温度
问题更新日期：2024-10-19 02:59:34
问题描述
pcr出现杂带为什么要升高退火温度，麻烦给回复
- 精选答案
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因为一是引物与靶序列不完全互补. 或引物聚合形成二聚体.二是Mg2+离子浓度过高.退火温度过低.及PCR循环次数 过多有关.其次是酶的质和量.往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶 则不出现.酶量过多有时也会出现非特异性扩增.其对策有：
①必要时重新设计引 物.②减低酶量或调换另一来源的酶.③降低引物量.适当增加模板量.减少循环次 数.④适当提高退火温度或采用二温度点法(93℃变性.65℃左右退火与延伸).
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