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gs细胞表达系统的原理

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问题更新日期:2024-10-19 06:55:59

问题描述

gs细胞表达系统的原理希望能解答下
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谷氨酰胺合成酶(GS)表达系统将外源基因插入到含有GS基因表达载体的下游,是生物制药行业广泛应用的哺乳动物表达系统之一。宿主细胞可以选择内源性不表达GS基因的重组鼠骨髓瘤细胞NSO、内源性表达GS基因的中国仓鼠卵巢细胞CHOK1或Lonza公司开发的CHOK1衍生细胞——CHOK1SV。CHOK1SV细胞表达内源性的GS基因,因此阳性转染子需要在MSX加压和无谷氨酰胺培养基的双重筛选中获得。

获得稳定高产的细胞株的常规筛选步骤为:构建表达载体、转染宿主细胞、加压筛选获得阳性多克隆细胞株、细胞株单克隆化、高表达单克隆细胞株的获得及质量评估。

其他回答

GS 系统(glutamine synthetase Gene Expression System)即谷氨酰胺合成酶基因表达系统,是新近发展的更有效率的扩增表达系统。谷氨酰胺合成酶能将谷氨酸和氨合成为谷氨酰胺,这种酶促反应是动物细胞获得谷氨酰胺的途径。