pcr鉴定不到目的片段的原因

问题描述

精选答案

1.模版可能有问题,可以重新提取rna,反转录后,再进行pcr

2.引物可能有问题,不特意或者自身形成特殊结构导致失败,可以尝试重新设计 合成引物

3.使用的反应体系有问题,最可能的是酶,查看是否过期,以及使用的反应程序是否与你使用的这款酶是匹配的

其他回答

建筑说

1.引物设计不合适：选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行PCR扩增时，扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短，容易出现假阳性。需重新设计引物。

2.靶序列或扩增产物的交叉污染，这种污染有两种原因