当分离胶加完后需在其上加一层水为什么

问题描述

精选答案

加一层水称为水封

目的是隔绝空气使催化反应快速进行，进而形成凝胶，还可使分离胶上沿平直。

并且加水后，保持分离胶表面的平整性，使浓缩胶和分离胶都处于同一水平面上。

甘氨酸是为了解离出甘氨酸根离子，甘氨酸根离子可以稳定的界面，使蛋白聚集在移动界面附近，浓缩在一起。

样品液煮沸这个问题我个人认为是可以商榷的，因为理论上煮沸可以使SDS和蛋白更快更好的结合，以便于SDS-PAGE的进行。但是有些蛋白似乎不煮沸直接上样结果更好。对于非还原Loading buffer（即不含巯基乙醇）的样品，一般是不要煮沸的。