葡萄糖色谱法原理

问题描述

精选答案

利用样品混合物中各组分理、化性质的差异，各组分程度不同的分配到互不相溶的两相中。当两相相对运动时，各组分在两相中反复多次重新分配，结果使混合物得到分离。

两相中，固定不动的一相称固定相；移动的一相称流动相。

分类：

根据流动相分—以气体作流动相—气相色谱——固定相为液体 气-液色谱

固定相为固体 气-固色谱

—以液体作流动相—液相色谱——固定相为液体 液-液色谱

固定相为固体 液-固色谱

—当流动相是在接近它的临界温度和压力下工作的液体时——超临界色谱

根据固定相的附着方式

—固定相装在圆柱管中—柱色谱

—固定相涂敷在玻璃或金属板上—薄膜色谱（平板色谱）

—液体固定相涂在纸上—纸色谱（平板色谱）

根据分离机理

—分配色谱—样品组分的分配系数不同

—吸附色谱— 样品组分对固定相表面吸附力不同

—体积排阻色谱—利用固定相孔径不同，把样品组分按分子大小分开

—离子交换色谱—不同离子与固定相商相反电荷间的作用力大小不同

根据极性

—流动相极性＞固定相极性-反相色谱

—流动相极性＜固定相极性-正相色谱

气相色谱只适合分析较易挥发、且化学性质稳定的有机化合物，而hplc则适合于分析那些用气相色谱难以分析的物质，如挥发性差、极性强、具有生物活性、热稳定性差的物质。所以，hplc的应用范围已经远远超过气相色谱。

一、吸附色谱（adsorption chromatography）

又叫液固色谱法：流动相是液体，固定相是固体。

分离原理：固定相是固体吸附剂，吸附剂是多孔性微粒物质表面有吸附中心。样品组分与流动相竞争吸附中心。各组分的吸附能力不同，使组分在固定相中产生保留时间不同和实现分离。

固定相： 固定相通常是强极性的硅胶、氧化铝、活性炭、聚乙烯、聚酰胺等固体吸附剂。活性硅胶最常用。

流动相： 弱极性有机溶剂或非极性溶剂与极性溶剂的混合物，如正构烷烃（己烷、戊烷、庚烷等）、二氯甲 烷/甲醇、乙酸乙酯/乙腈等。

应用： 对于极性，结构异构体分离和族分离仍是最有效的方法，如农药异构体分离、石油中烷、烯、芳烃的分离。 缺点是容易产生不对称峰和拖尾现象。