怎么设置一个浓度梯度

问题描述

精选答案

尿素在纯化包涵体时用，一般用8M的尿素加到含有咪唑的磷酸缓冲液中，纯化可溶性蛋白时不用加尿素。

洗杂蛋白时咪唑的浓度一般是20mM。洗脱目的蛋白时咪唑浓度在500mM时能将大部分蛋白都洗脱下来，如果想让蛋白纯度高的话，可以用不同的咪唑浓度，设置成梯度进行洗脱，我们实验室一般是80mM，100mM，200mM，500mM，但是用梯度洗脱有个缺点就是可能你的目的蛋白被稀释，浓度降低。