pcr数据怎么处理

问题描述

精选答案

数据处理如下

（1）扩增曲线：扩增曲线有两种展现形式，一种是线性，一种是对数形式。我们通常是用CT 来推算样品中样品的浓度。CT 值越高说明模板浓度越低。上面也详细说明了原理，在这里就不过多赘述。

（2）标准曲线：将已知浓度的样品（标准品）经过梯度稀释后分别取样进行荧光定量PCR，得到的一系列的Ct值，用这个Ct值与Log模板数对应可以得到一个相关的曲线，我们叫标准曲线。可以用这个标准曲线中的一些参数来判断这个荧光定量PCR体系的优劣。

（3）熔解曲线：Tm值，Melting Temperature（解链温度），PCR双链产物的退火温度。这两个图是在荧光定量PCR结束后，对产物进行逐步升温时进行的监测，可以看到在达到其解链温度时，荧光信号会有一个忽然的下降。我们将测得的这个曲线叫做熔解曲线。理论上如果PCR得到特异性产物则只有一个Tm值，在溶解曲线上表示只有单峰存在。如果是多相峰，那么可以判断产物不是单一的，发生了非特异扩增