dna切口平移法标记探针的意义

问题描述

精选答案

(一)切口平移法(nick translation)标记双链DNA探针

当双链DNA分子的一条链上产生切口时，E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3 蒺羟基末端。同时该酶具有从5 蒺→3 蒺的核酸外切酶活性，能从切口的5 蒺端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3 蒺端补上核苷酸，从而使切口沿着DNA链移动，用放射性核苷酸代替原先无放射性的核苷酸，将放射性同位素掺入到合成新链中。最合适的切口平移片段一般为50～500bp。