如何解决pcr复孔差异过大

问题描述

精选答案

两次的差异大,可能是cDNA的保存问题,一般保存在-20度,但是时间长了就会有所降解.

如果降解了,你再做,相对表达量就会降低.

至于复孔之间的差异,我到觉得不是很大,0.5以内可以了,已经RT-PCR只是一个半定量的方法.

这种情况最需避免的就是加样的时候造成了加样量之间的误差,建议多做几个重复,将重复中数据明显差距几个以上的循环的数据剔除.加样的时候样品混合好再分装.