农夫山泉水大肠菌群检验方法
问题描述
- 精选答案
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20:
农夫山水大菌群检验方法
1.水样稀释:制备水样10-1、10-2的稀释
液,方法为用无菌移液管吸取水样10mL放于
盛有90mL无菌水和若干玻璃珠的锥形瓶中,
充分振荡使混合均匀,并使其中的细菌尽量
呈单个存在,即为10-1稀释液再从10-1制备
10-2稀释液。以此类推,稀释到所需倍数。
2接种和培养:以无菌操作于5支三倍浓缩培
养基(接种前一定应先检查杜汉氏小管内有无
气泡)中各加入水样10mL,5支普通培养基试
管中加入水样1mL,5支普通培养基试管中加
入10-1稀释液1mL,小心混匀放入37℃培养
箱中培养24h此即5管法。
3.结果观察:37℃中培养24h后取出观察,观
察有无气体(杜汉氏小管内有无气体)和酸产生
(培养基有无变色)。在48h之间,培养管内倒
置的杜汉氏小管内有任何量的气体积累,或
培养基颜色从紫色变为黄色,便可初步断定
为阳性反应。
若所测定的15支管中均为阳性反应,说明浓
水样污染严重,可将样品进一步稀释后,
- 其他回答
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3.1多管发酵法
根据大肠菌群细菌具有的生物特性,如革兰氏阴性无芽孢杆菌,在37℃培养24h能发酵乳糖并产气的特点,将不同量的水样接种到含乳糖的培养基中,经培养后根据阳性反应结果可测出原水样中大肠菌群的最可能数(MPN)。
3.2滤膜法
采用孔径为0.45μm水相微孔薄膜,将水中所含的细菌截留在滤膜上,然后将滤膜贴在选择性鉴别培养基上,经37℃培养24h后,大肠菌群细菌在滤膜上长出具有特征性的菌落,直接计数典型菌落数,计算出每100mL水样中所含的大肠菌群数。
大肠菌群可产生β-半乳糖苷酶,分解培养基中的酶底物-茜素-β-D-半乳糖苷(以下简称Aliz-gal),使茜素游离并与固体培养基中的铝、钾、铁、铵离子结合形成紫色(或红色)的鳌合物,使菌落呈现相应的颜色。
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