dna磁珠分选原理
问题描述
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磁珠法 纯化DNA原理
磁珠法核酸纯化技术采用了纳米级磁珠微珠,这种磁珠微珠的表面标记了一种官能团,能同核酸发生吸附反应。硅磁(Magnetic Silica Particle)就是指磁珠微珠表面包裹一层硅材料,来吸附核酸,其纯化原理类型于玻璃奶的纯化方式。
离心磁珠是指磁珠微珠表面包裹了一层可发生离心交换的材料(如DEAE,COOH)等,从而达到吸附核酸目的。不同性质的磁珠微珠所对应的纯化原理是不一致。使用磁珠法来纯化核酸的最大优点就是自动化。磁珠在磁场条件下可以发生聚集或分散,从而可彻底摆脱离心等所需的手工操作流程。Omega拥有全面的磁珠法核酸分离试剂盒,基于这种技术的试剂盒,名称前都有’Mag-Bind’。
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DNA磁珠分选的原理基于SPRI(Solid Phase Reversible Immobilization)技术。在存在PEG和NaCl的条件下,DNA构象发生急剧变化,暴露出磷酸骨架上的磷酸基因(带负电荷)与磁珠表面的羧基结合。
带负电荷的磷酸基团借助解离的Na+与羧基之间形成离子桥,使DNA被特异性吸附到磁珠表面。最终利用磁珠的磁性在磁场环境中进行分离和洗脱。
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