质粒DNA提取时质粒为何会丢失

问题描述

精选答案

首先是你的质粒拷贝数,多的当然好了.低拷贝的可以在收菌前一小时用氯霉素加压筛选下.第二看你是用试剂盒还是手提了,试剂盒的话基本没什么问题,记住几个要点就行.1）溶液2和溶液3加完后混匀要轻柔,越轻越好,否则由基因组污染.2）溶液2和溶液3最好在冰上操作.3）冷结合热洗脱,上柱时温度4度,洗脱时50度-60度.手提的话除了上述几点还要注意RNA的消除,除了LiCl沉淀以外,RNA酶也必不可少,最好37度消1小时以上.别的网上有很多相关的参考,操作时注意些没问题的.