亲和层析的原理介绍

问题描述

精选答案

亲和层析是一种吸附层析，抗原（或抗体）和相应的抗体（或抗原）发生特异性结合，而这种结合在一定的条件下又是可逆的。

所以将抗原（或抗体）固相化后，就可以使存在液相中的相应抗体（或抗原）选择性地结合在固相载体上，借以与液相中的其他蛋白质分开，达到分离提纯的目的。此法具有高效、快速、简便等优点。

扩展资料：

亲和层析过程中的注意事项

1、上样

亲和层析纯化生物大分子通常采用柱层析的方法。亲和层析柱一般很短，通常10cm左右。上样时应注意选择适当的条件，包括上样流速、缓冲液种类、pH、离子强度、温度等，以使待分离的物质能够充分结合在亲和吸附剂上。

2、洗脱

亲和层析的另一个重要的步骤就是要选择合适的条件使待分离物质与配体分开而被洗脱出来。亲和层析的洗脱方法可以分为两种：特异性洗脱和非特异性洗脱。

由于亲和吸附达到平衡比较慢，所以特异性洗脱往往需要较常的时间和较大的洗脱条件，可以通过适当的改变其它条件，如选择亲和力强的物质洗脱、加大洗脱液浓度等等，来缩小洗脱时间和洗脱体积。

非特异性洗脱选择洗脱液的pH、离子强度时应注意尽量不影响待分离物质的活性，而且洗脱后应注意中和酸碱，透析去除离子，以免待分离物质丧失活性。

其他回答

学习超能手

肝素柱子是亲和柱的一种，主要原理就是可以跟一些生物大分子特异性结合，具体原理如下：

r 肝素（Heparin）是一种含硫酸酯的酸性多糖，能和抗凝血因子III、凝血酶、类凝血酶、人凝血因子IX、XI和VIII，也能和大肠杆菌表达的人白介素、人前列腺生长因子、重组人血管内皮生长因子 、软骨生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、重组人酸性成纤维细胞生长因子、重组肝细胞生长因子、重组鼠肝素辅因子II、重组人血小板第四因子、重组人内皮抑素、重组人角质细胞生长因子等生物大分子结合，所以肝素亲和层析介质可以用于这类物质的纯化。

r 肝素亲和层析介质（Heparin）以高流速琼脂糖微球为基质，采用环氧活化工艺，将肝素偶联到琼脂糖凝胶上，该填料具有很高的物理、化学稳定性，配基不易脱落，使用寿命长，使用方便，应用广泛。

r