如何用硅胶柱处理无水试剂希望能解答下

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1.称量：200-300目硅胶，称30-70倍于上样量，如果极难分，也可以用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右，所以要称40g硅胶，用烧杯量100ml也可以。

2搅成匀浆：加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌，如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯丙酮体系，就用石油醚拌，如果洗脱剂是氯仿醇体系，就用氯仿拌，如果不能搅成匀浆，说明溶剂中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不与水配伍走分配色谱的话，必须预先用无水硫酸钠久置干燥。氯仿用无水氯化钙干燥，以除去1%的醇。如果样品对酸敏感，不能用氯仿体系过柱。

3.装柱：将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加入约1/3 体积石油醚(氯仿)，装上蓄液球，打开柱下活塞，将匀浆一次倾入蓄液球内，随着沉降，会有一些硅胶沾在蓄液球内，用石油醚(氯仿)将其冲入柱中。

4. 压实：沉降完成后，加入更多的石油醚，用双联球或气泵加压，直至流速恒定，柱床约被压缩至9/10体积，无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步，可使分离度提高很多，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。

5.上样：干法湿法，海沙是没必要的。上样后，加入一些洗脱剂，再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面，然后就可以放心地加入大量洗脱剂，而不会冲坏硅胶表面。压实：沉降完成后，加入更多的石油醚，用双联球或气泵加压，直至流速恒定，柱床约被压缩至9/10体积，无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步，可使分离度提高很多，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。

6.过柱和收集：柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡，太低的洗脱强度并不好，推荐用梯度洗脱。收集的例子：10mg.上样量，1g硅胶H,0.5ml收—馏分，1-2g上样量，50g硅胶(200-300目),20-50ml收—馏分。

7.检测：更多地使用专用喷显剂，如果仅用紫外灯，会损失较多产品，紫外的灵敏度-般比喷显剂底1-2个数量级。

8.送谱：收集的产品旋干，在送谱前通常需要重结晶。如果样品太少或为液体，可过一-小凝胶柱，作为送谱前的最后纯化手段。可除去氢谱1.5ppm左右所谓的“硅胶"峰。