液相色谱中，调节流动相pH值能影响主峰色谱吸收吗

问题描述

精选答案

在色谱柱耐受的范围内，流动相pH值的改变影响最大的是色谱峰的保留时间，保留时间改变进而峰形也随之改变。在反相色谱条件下，分析的物质在流动相中处于完全解离状态时，出峰最快；而处于全部非解离状态下，出峰最慢；有部分解离时，峰形应该是比较差的。

采用反相色谱法分离弱酸（3≤pKa≤7）或弱碱（7≤pKa≤8）样品时，通过调节流动相的pH值，以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上的保留，并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸，流动相的pH值越小，组分的k值越大，当pH值远远小于弱酸会计考试的pKa值时，弱酸主要以分子形式存在；对弱碱，情况相反。分析弱酸样品时，通常在流动相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和1%醋酸溶液；分析弱碱样品时，通常在流动相中加入少量弱碱，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和30mmol/L三乙胺溶液。

注：流动相中加入有机胺可以减弱碱性溶质与残余硅醇基的相互作用，减轻或消除峰拖尾现象。所以在这种情况下有机胺（如三乙胺）又称为减尾剂或除尾剂。