多管发酵法检测大肠菌群的步骤
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多管发酵法是一种常用于检测大肠菌群的方法,其步骤如下:
1. 准备样品:将待检测的水样或食品样品取一定量,经过适当的处理后,制成10^-2-10^-4的浓度悬液。
2. 制备多管:将多个空的试管或发酵管按照检测要求进行编号,每个试管或发酵管的底部加入适量的无菌液体培养基,如LST(Lauryl Sulfate Tryptose)培养基,MacConkey培养基等。
3. 加样:取适量的样品悬液分别注入不同编号的管内,每个管中的悬液体积应相同。
4. 发酵:将试管或发酵管放入恒温培养箱内(通常为35-37℃),进行24-48小时的培养。
5. 判断结果:通过观察每个试管或发酵管内的菌落、气泡、颜色等情况,判断是否存在大肠菌群。一般认为,管内有产生气泡、颜色变化或者有明显的菌落生长即为阳性。
6. 计算菌数:根据检测结果,可通过计算公式计算出样品中大肠菌群的数量。
需要注意的是,多管发酵法只能检测大肠菌群是否存在,但不能确定大肠菌群中是否存在致病菌,因此在实际应用中还需要结合其他方法进行综合判断。
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选择3个合适的连续稀释度,每个稀释度接种3管月桂基,36度培养48时,将所有产气管接种BGLB肉汤,36度培养48时,根据产气管数查MPN表得出结果。
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