铁盐催化分光光度法

问题描述

精选答案

1．原理原花青素经热酸处理，并在硫酸铁铵的催化作用下，水解生成红色的花青素(花色素)。在最大吸收波长546nm处测定吸光度值，计算试样中原花青素含量。

2．分析步骤对于固体试样，精确称取研细、混匀的试样，加入甲醇，超声波提取，甲醇定容，摇匀，离心后取上清液备用。

对于含油试样，用甲醇分数次搅拌洗涤，直至甲醇提取液无色，加甲醇定容备用。对于口服液，吸取适量样液，甲醇定容，摇匀供分析用。

用甲醇配制原花青素标准系列。将正丁醇与盐酸按95：5的体积比混合后，加入硫酸铁铵溶液，再加入标准系列溶液或样液，混匀，置沸水浴回流，准确加热40分钟后，立即置冰水中冷却，于546nm波长处测定吸光度值，用标准曲线法定量。

3．方法说明

(1)原花青素水解氧化为花色素，水解程度随温度的升高而增大，在100℃时达到最大值。该反应随加热时间的增长，花色素含量增加，当加热40分钟时，花色素含量达到最大值，所以应严格控制水解的温度和时间。

(2)硫酸铁铵起催化剂的作用，未使用铁盐与使用铁盐相比，样品的测定值降低近40%。

(3)本法最低检出量为3 ug，最低检出浓度为3ug/ml，最佳线性范围：3～150ug/ml。