酵母菌染色的方法

问题更新日期：2024-10-31 13:13:17

问题描述

精选答案

1 ）核 DNA 和线粒体 DNA

1． 当细胞培养到约 107 细胞 /ml 时，离心（ 5 秒）收集细胞，再悬浮在 70 ％乙醇中。

2． 固定 5 分钟或 5 分钟以上，用水洗 2 次。

3． 将细胞悬浮在含有 50ng/ml 的 4 ， 6- 二脒基 -2 苯基吲哚的封固剂中。 1mg/ml 的 4 ， 6- 二脒基 -2 苯基吲哚母液可在－ 20 ℃下贮存。

4． 用紫外滤片观察。

2 ）线粒体

1． 在生长培养基中培养细胞达到约 107 细胞 /ml 时，加入 100ng/ml 3 ， 3’- 二已基噁羰花青碘化物（ DiOC6 ， Sigma D3652 或 Molecular Probes ）用乙醇把 1mg/ml 母液稀释到 1/104 。

2． 培养 5 分钟或 5 分钟以上，用荧光素滤片观察。

3 ）液泡

1． 当细胞生长到约 107 细胞 /ml 时，离心收集细胞（ 5 秒），悬浮在含有 50mmol/L 柠檬酸钠（ pH4.0 ）的 YPD 中。

2． 加 CDCFDA （羧基 -2’,7’- 二氯 - 荧光素双乙酸盐）到终浓度为 10 μ mol/L 。

3． 保温10 分钟或 10 分钟以上，用荧光滤片观察。

4 ）牙痕和几丁质

1． 用生长培养基培养细胞达 107 细胞 /ml 时，加 100 μ g/ml Calcofluor （荧光发光剂 28 ； Sigma F3543 ）（用水将 1mg/ml 母液稀释到 1/10 ，母液可在－ 20 ℃下黑暗保存数星期）。

2． 培养 5 分钟或 5 分钟以上，用水洗 2 次，用紫外滤片观察

其他回答

造价世界观

酵母菌染色

1.

标记:取一洁净载玻片,在玻片透明区正中央画一 直径约1cm的涂片区,反扣玻片,用另一面涂片。

2.

涂片:将棉签放入酵母菌稀释液中浸湿后在杯壁 上挤去多余的液体后,直接用棉签在涂片区 涂片。

3.

干燥:方法同革兰染色。

4.

直接镜检: 用高倍镜观察镜下形态。

其他回答

合肥成考

不需要染色的，一般观察酵母菌都是不染色的。酵母菌细胞较大，不必染色即可用显微镜观察其形态.如果要染色确实很难，因为酵母菌是真菌，有细胞壁的存在，因为这层真菌的细胞壁很顽固，和细菌的不一样，一般染不上色，只有在酵母菌死了之后，通透性大大增加，这样我们才能用0.1%美兰使其着色，其实这就是死活酵母细胞的染色鉴别试验。根据资料它的芽孢容易被染上。