植物细胞融合的步骤

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精选答案

植物细胞融合是植物细胞工程的一个重要分支，是一种突破物种生殖隔离、创造远缘杂种的新途径，原生质体技术还可用于细胞突变体的筛选、细胞器移植和外源DNA的导入。植物细胞融合包括原生质体的制备、细胞融合的诱导、杂种细胞的筛选和培养，以及植株的再生和鉴定等环节。

原生质体的融合方法经历了一个逐步改进和完善的过程。在早期原生质体融合的方法有NaNO3法、高pH/高Ca2+法、PEG（聚乙二醇）法，后来逐渐发展为PEG与高Ca2+、高pH相结合；20世纪80年代初又开始探索使用电融合法，并发展出一些其他方法。这些方法各有特点，但广泛使用的是PEG法和电融合法。

配子-体细胞原生质体融合技术主要借鉴了体细胞原生质体的融合方法。性细胞原生质体对融合处理很敏感，容易与其它原生质体融合。但是因为它的形态、密度等多不同于体细胞原生质体，其融合技术与体细胞杂交有所差异。影响因素主要有融合处理方式、原生质体密度与比率、融合诱导剂的浓度等。性细胞原生质体往往形体小而密度大，为了提高融合效率，通常在提高性细胞原生质体密度的同时，相对降低后者的密度，以寻求最佳比例

原生质体融合的方式

原生质体的融合方式有两种：对称融合和非对称融合。通过这两种融合方式可产生3种类型的杂种：对称杂种、非对称杂种和胞质杂种。

其他回答

漫漫自考路

原生质体制备——原生质体融合 原生质体制备：一般采用纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶（以品种而异），显微镜下观察，细胞变圆就可以了。离心洗涤除酶，收集原生质体。纯化原生质体。期间注意用等渗溶液。

原生质体融合：化学融合（常用PEG聚乙二醇诱导融合法）， 有条件的话电融合更可取，需要用到电融合仪器。最主要和麻烦的是第一步原生质体制备，融合是靠仪器完成的。